2×高保真PCR預(yù)混液（PCR系列）

2×高保真PCR預(yù)混液（PCR系列）
1. 產(chǎn)品描述：

信勵(lì)致和®2×高保真PCR預(yù)混液包含Pfu DNA Polymerase、dNTP 以及優(yōu)化的緩沖體系，只需加入引物和模板即可進(jìn)行擴(kuò)增，減少了移液操作，提高了檢測通量和結(jié)果的重現(xiàn)性。體系中加入的保護(hù)劑使得Pfu DNA Polymerase經(jīng)過反復(fù)凍融后仍可保持穩(wěn)定的活性；體系中不包含電泳指示劑。通過改造，信勵(lì)致和的Pfu DNA Polymerase在長片段擴(kuò)增能力、擴(kuò)增特異性以及擴(kuò)增產(chǎn)量方面得到了大幅度提升。其錯(cuò)配率是普通Taq酶的1/83，用于細(xì)菌、真菌、植物組織、動(dòng)物組織的直接PCR，擴(kuò)增產(chǎn)物為平端。

2. 產(chǎn)品特點(diǎn)：

（1）本產(chǎn)品為高保真PCR擴(kuò)增試劑，產(chǎn)品的反應(yīng)靈敏度高，擴(kuò)增的特異性好。

（2）本產(chǎn)品可進(jìn)行長片段基因擴(kuò)增，使用 λDNA、質(zhì)粒等簡單模板，可以有效擴(kuò)增長達(dá)15 kb的片段；使用基因組DNA等復(fù)雜模板，可以擴(kuò)增長達(dá)10 kb的片段。

3.用途：
長、短片段高保真DNA片段擴(kuò)增。

2×高保真PCR預(yù)混液（PCR系列）

1. 產(chǎn)品組分：

2. 儲(chǔ)運(yùn)條件：

-25～-15℃保存12個(gè)月，干冰運(yùn)輸。

3. 注意事項(xiàng)：

使用前混勻，產(chǎn)品避免反復(fù)凍融。

1. 產(chǎn)品擴(kuò)增效果測試：

在一致條件下，以2000 bp的λDNA和5000 bp的質(zhì)粒為模板進(jìn)行擴(kuò)增測試，結(jié)果如上圖所示，我司的2×高保真PCR預(yù)混液擴(kuò)增產(chǎn)物量明顯高于市場典型競品，本產(chǎn)品具有很好的擴(kuò)增效果。

2. 擴(kuò)增模板兼容性測試：

使用2×高保真PCR預(yù)混液分別以λDNA、質(zhì)粒、基因片段為模板進(jìn)行目的片段擴(kuò)增，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如上圖所示，測試使用的三種模板，本產(chǎn)品均能成功完成擴(kuò)增，實(shí)驗(yàn)結(jié)果有力地證明了本產(chǎn)品的模板兼容性好。

常見問題

1. 產(chǎn)物沒有或很少？

原因分析：模板濃度過低；實(shí)驗(yàn)樣品DNA損傷或降解；PCR條件未優(yōu)化；退火溫度過高；延伸時(shí)間太短；循環(huán)次數(shù)太少；引物設(shè)計(jì)不完善；引物濃度過低；Mg2+濃度未優(yōu)化；模板質(zhì)量太差。

解決方案：建議DNA樣品不要反復(fù)凍融，以免造成DNA的損失；優(yōu)化PCR條件，對于基因片段較長的片段適當(dāng)增加延伸時(shí)間，增加循環(huán)數(shù)。

2. 產(chǎn)物為多條帶？

原因分析：引物濃度為優(yōu)化或者引物降解；退火溫度過低。

解決方案：建議將引物置于4℃或者-20℃保存；適當(dāng)調(diào)整退火溫度。

3. 產(chǎn)物有污染？

原因分析：模板用量過多；Mg2+濃度未優(yōu)化；PCR中的長片段來源于長的基因組DNA。

解決方案：適當(dāng)減少模板用量；盡量使用雜質(zhì)含量少的模板進(jìn)行擴(kuò)增。