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      斑點濾膜結合法

      發布時間: 2022-03-14  點擊次數: 1302次


      原理


      材料與儀器


      待測蛋白質樣品
      10%三氯醋酸(TCA) 考馬斯亮藍凝膠染色液 考馬斯亮藍凝膠脫色液
      Whatman 3 MM 濾紙


      步驟



      1. 用鉛筆在 3 mm 濾紙上畫出 1 cm x 1 cm 大小的方格;


      2. 在每一方格中心加入 3 ul 樣品;


      3. 將濾紙涼干,大約需要 15 min;


      4. 將濾紙浸入 10% TCA 溶液中 30 s(TCA 溶液可重復使用);


      5. 用水快速漂洗濾紙;


      6. 將濾紙浸入考馬斯亮藍凝膠染液中 30 s(染液可重復使用);


      7. 用水快速漂洗濾紙;


      8. 在考馬斯亮藍凝膠脫色液中使濾紙脫色,脫色在幾分鐘之內完成;


      9. 通過相應顯藍色的方格,可判斷其含有一定量的蛋白質存在。



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