銷售熱線

    19126518388
    • 技術(shù)文章ARTICLE

      您當(dāng)前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 乙醇沉淀法

      乙醇沉淀法

      發(fā)布時間: 2021-12-17  點擊次數(shù): 4845次

      原理

      DNA 溶液是DNA以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在,當(dāng)加入乙醇時,乙醇會奪DNA周圍的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般實驗中,是加2倍體積的無水乙醇與DNA相混 合,其乙醇的最終含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇來替代懈水乙醇(因為無水乙醇的價格遠(yuǎn)遠(yuǎn)比95%乙醇昂貴)。但是加95%的乙醇使總體積增大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA損失也增大,尤其用多次乙醇沉淀時,就會影響收得率。折中的做法初次沉淀DNA時可用95%乙醇代替無水乙醇,最后的沉淀步驟要使用無水乙醇。也可以用0.6倍體積的異丙醇選擇性沉淀DNA.一般在室溫下放置15-30分鐘即可。

      材料與儀器

      DNA
      乙酸鈉 乙醇
      EP管 低溫離心機 移液器 -70度冰箱

      步驟


      1. 酶切前確定待切樣品的濃度, 并選擇合適的限制性內(nèi)切酶和配套Buffer。
       
      2. 在離心管中加入如下成分:
      10xBuffer   1ul
      待切樣品   xul
      酶      0.5-1ul
      ______________________
      加水補足10ul
       
      3. 混勻樣品并短暫離心使樣品沉于管底。
       
      4. 將離心管置于37℃中溫育1-3hr,若待切樣品為PCR 產(chǎn)物,則可將反應(yīng)時間適當(dāng)延長。
       
      5. 用未酶切的質(zhì)粒作為對照,瓊脂糖電泳鑒定酶切結(jié)果。
       
      注:當(dāng)酶切樣品用于回收而不是鑒定時,可按比例適當(dāng)加大反應(yīng)體積。雙酶切可選用二者活性都較高的Buffer 或者通用Buffer,但要注意不能有星反應(yīng)。


      注意事項

      移去上清液時需要緩慢操作,以免將DNA樣品弄出。

      常見問題

      乙醇可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學(xué)反應(yīng),對DNA很安全,因此是理想的沉淀劑。

      以上就是本期的內(nèi)容,更多資訊,歡迎關(guān)注安培生物科技有限公司了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


      安培生物科技有限公司介紹:

      安培生物堅持為生命科學(xué)研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。



    產(chǎn)品中心 Products
    色悠久久久久久久综合网| 久久免费观看视频| 色综合久久一区二区三区| 四虎国产精品成人免费久久| 久久伊人精品青青草原日本| 久久国产精品61947| 国产精品久久久久久久app| 国产69精品久久久久9999| 久久精品国产亚洲AV果冻传媒 | 99re久久在热线播放最新地址| 国内精品伊人久久久久妇| 久久精品国产72国产精福利| 亚洲国产精品一区二区久久| 久久电影网午夜鲁丝片免费 | 无码国内精品久久综合88 | 久久青青草原亚洲av无码app| 久久国产精品成人无码网站| 久久久久久久久久国产精品免费| 亚洲精品美女久久久久久久 | 久久国语露脸国产精品电影| 午夜精品久久久内射近拍高清| 97久久免费视频| 久久无码一区二区三区少妇| 国产精品久久无码一区二区三区网 | 久久亚洲国产成人影院网站 | 麻豆久久婷婷五月综合国产| 久久久精品人妻一区二区三区蜜桃| 狠狠色丁香久久综合五月| 99久久久精品免费观看国产| 婷婷久久香蕉五月综合加勒比| 亚洲AV无码成人网站久久精品大| 性做久久久久久免费观看| 久久精品国产亚洲av水果派| 久久99精品福利久久久| 国产精品女同久久久久电影院| 区久久AAA片69亚洲| 国产精品久久久久免费a∨| 久久精品国产亚洲AV麻豆网站| 久久久久久亚洲精品中文字幕| 久久久国产精品网站| 精品久久久无码人妻字幂|