細胞培養常遇問題集錦（六）

26、

▲問：有時候細胞和細胞之間就會出現這種小黑點，高倍鏡下看少數在原地打轉，但是培養液不渾濁。那其中不會動的是細菌嗎？

答：原地打轉的可能為黑膠蟲，會動的是細菌，細菌有鞭毛。黑膠蟲是一種現象，身份可能是細菌，有鞭毛會游動。

27、

問：想問一下，已經使用三抗以及抗支原體的藥物培養細胞一周，但還是有少量黑膠蟲，但細胞生長狀態還好，這樣的話接下來還需要處理嘛？好像有一種有少量黑膠蟲但不影響細胞狀態可以不做處理的說法？

答：一周，黑膠蟲數量減少，已經見效了，但還是要繼續處理，因為黑膠蟲和細胞有此消彼長的特點，細胞復蘇或剛傳代時，因為此時細胞狀態差，所以特別容易爆發黑膠蟲，黑膠蟲數量增多，當細胞復蘇率增強時，黑膠蟲數量會減少。

28、

問：話說養細胞的時候，一直加雙抗，會對哪些實驗有影響呢？之前聽說做干擾的時候，要撤雙抗。

答：一般做功能學實驗，藥理學，毒理學，信號通路都要撤掉雙抗。

29、

問：Cho傳代接種密度0.4 e5，4天才長到11e5，是怎么回事？DT從16.5變成20了。一直都用的一樣的培養基，是不是凍溶會影響？是cho細胞，搖瓶培養。

答：檢查一下營養體系是不是不適合，如不是，那就考慮是胰酶消化這一步是不是有問題。你這邊是把cho貼壁馴化成懸浮了。

30、

問：請問怎么培養破骨細胞？怎么提取到培養的protocol？遇到一個情況，怎么消化也消化不下來，想從源頭找一找，是什么原因？

答：破骨細胞的培養方法主要有：骨髓機械分離法，骨髓細胞誘導法，脾干細胞誘導法，血液單核細胞誘導法，小鼠RAW264.7細胞系誘導法及骨巨細胞瘤分離法。

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