細(xì)胞培養(yǎng)之“黑膠蟲”的防治

“黑膠蟲"/“Nanobacteria"究竟是何方神圣？《生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展》雜志（PIBB）2020年第1期發(fā)表了題為細(xì)胞培養(yǎng)中“黑膠蟲"污染的檢測及防治一文。根據(jù)作者描述，“黑膠蟲"污染具有以下特征：

1. 培養(yǎng)基和正常培養(yǎng)基沒有區(qū)別；

2. 低倍鏡下它是黑色的點(diǎn)點(diǎn)和細(xì)胞碎片沒有區(qū)別

3. 高倍鏡下它會做運(yùn)動(dòng)給你看，也能模仿細(xì)胞碎片和細(xì)胞分泌物的布朗運(yùn)動(dòng)。還有黑膠蟲“路癡"到處跑的。

4. 與細(xì)胞的數(shù)量成反比，細(xì)胞越多，它越少，細(xì)胞越少它越多

5. 細(xì)胞狀態(tài)越養(yǎng)越差。

該科研成果除了得出這些結(jié)論外，還成功的鑒定出“黑膠蟲"為缺陷短波單胞菌屬新菌株，連名字都有了叫：Brevundimonas sp. GYBL3。

當(dāng)然也有實(shí)驗(yàn)結(jié)果表示：初感染黑膠蟲對細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)都沒有影響，但是后續(xù)細(xì)胞生長越來越慢，甚至停滯不長，黑點(diǎn)越來越多，直到細(xì)胞“全軍覆沒"。

黑膠蟲的防治：

1、盡量使用好的血清，但是好的血清一般價(jià)格高的離譜，經(jīng)濟(jì)條件不允許，也可以選用進(jìn)口新生牛血清代替。建議如果使用的是好的血清可不必滅活，這樣可以減少“小黑點(diǎn)"的形成。

2、如果是貼壁細(xì)胞的話，可用無菌的PBS洗幾次，可一定程度上緩解。若是懸浮的話，就不太好處理啦，可以向其中少加一點(diǎn)滋養(yǎng)細(xì)胞。加滋養(yǎng)細(xì)胞對有黑膠蟲的剛復(fù)蘇的細(xì)胞很有效！要是復(fù)蘇很久的細(xì)胞，那就用PBS反復(fù)離心幾次 ，一般建議是800-1000轉(zhuǎn)3分鐘， 離心2到3次，重新種植，加四環(huán)素等抗黑膠蟲的藥物進(jìn)行抑制，讓細(xì)胞盡快長起來，黑膠蟲就消失了。

3、換用信得過的塑料培養(yǎng)瓶。

4、停止復(fù)蘇，停止養(yǎng)細(xì)胞，*消毒所有用于細(xì)胞培養(yǎng)的一切用品，包括所用的培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)基，吸管，胰酶，孵箱，超凈臺、空間等等你能想到的和細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的所有物品，當(dāng)然也別忘了您的白大褂。

5、如果有其它可用的細(xì)胞，那么污染的細(xì)胞最好扔掉；如沒有，可試著用氯霉素 ，紅霉素，或四環(huán)素進(jìn)行抑制，或選用黑膠蟲抑制劑。

6、minocycline具有抑制的作用，可以在換液的時(shí)候使用。由于黑膠蟲尚未明確鑒定出是什么生物，所以上述的處理方法不一定正確，可以供考慮采用。